關于青島日水培養基質控報告改版的通知
發布時間：
2022-11-16
作者：
培養皿培養基
青島日水培養基質控報告將于2014年1月1日起改為最新排版，相應文件請到公司網站的下載版塊下載。
特此通知。
青島日水生物技術有限公司
GB 4789.41-2016食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 腸桿菌科檢驗
部分內容如下：
附 錄 B
培養基和試劑
B. 1 緩沖蛋白胨水( BPW )
B. 1. 1 成分
蛋白胨 10.
0g
氯化鈉
5. 0g
磷酸氫二鈉
3. 5g
磷酸二氫鉀
1. 5g
蒸餾水
1000. 0mL
B. 1. 2 制法
將 B.
1. 1 成分加熱溶解,于 25℃ 時調節
pH
至 7.
2±0. 2 ,分裝于 500mL 廣口瓶中,每瓶 225mL ,
121℃ 高壓滅菌 15min 。
B. 2 緩沖葡萄糖煌綠膽鹽肉湯( EE 肉湯)
B. 2. 1 成分
蛋白胨
10. 0g
葡萄糖
5. 0g
磷酸氫二鈉(無水)
6. 45g
磷酸二氫鉀
2. 0g
牛膽鹽
20. 0g
煌綠
0. 0135g
蒸餾水
1000. 0mL
B. 2. 2 制法
將 B.
2. 1 成分溶于水中,加熱煮沸至完全溶解,加熱不宜超過 30min ,迅速冷卻培養基,于 25℃ 調
節
pH
至 7.
2±0. 2 ,分裝于滅菌的 18mm×180mm 試管中,每管 10mL ,不需高壓滅菌, 5℃±3℃ 可存
放一個月。
B. 3. 1 成分
蛋白胨
7. 0g
酵母浸膏
3. 0g
3 號膽鹽 1. 5g
葡萄糖
10. 0g
氯化鈉
5. 0g
GB4789. 41 — 2016
10
中性紅
0. 03g (或 0. 6% 酒精溶液 5mL )
結晶紫
0. 002g (或 0. 1% 水溶液 2mL )
瓊脂粉
10. 0g~12. 0g
蒸餾水
1000. 0mL
B. 3. 2 制法
將 B.
3. 1 成分溶于水中,加熱煮沸至完全溶解, 25℃ 時調節
pH
至 7.
4±0. 2 ,分裝于滅菌的錐形燒
瓶中,不需高壓滅菌,用前制備。傾注平板,使用前干燥平板。未干燥的平板 5℃±3℃ 可存放兩周。
B. 4 營養瓊脂( NA )
B. 4. 1 成分
牛肉浸膏
3. 0g
蛋白胨
5. 0g
瓊脂粉
10. 0g~12. 0g
蒸餾水
1000. 0mL
B. 4. 2 制法
將 B.
4. 1 成分溶于水中,加熱煮沸, 25℃ 時調節
pH
至 7.
3±0. 2 , 121 ℃ 高壓滅菌 15min 。傾注平
板,使用前干燥平板。未干燥的平板于 5℃±3℃ 可存放兩周。
B. 5 葡萄糖瓊脂
B. 5. 1 成分
胰蛋白胨
10. 0g
酵母浸膏
1. 5g
葡萄糖
10. 0g
氯化鈉
5. 0g
溴甲酚紫
0. 015g (或 0. 4% 溴甲酚紫酒精溶液 3. 75mL )
瓊脂粉
10. 0g~12. 0g
蒸餾水
1000. 0mL
B. 5. 2 制法
將 B.
5. 1 成分溶于水中,加熱煮沸, 25℃ 時調節
pH
至 7.
0±0. 2 ,分裝于 15mm×150mm 試管,每
管約 5mL ,
121℃ 高壓滅菌 15min 后,試管垂直放置。于 5℃±3℃ 可存放 1 周。為去除培養基中的
氧氣,使用前可將葡萄糖瓊脂試管置于沸水浴中 15min ,然后迅速冷卻,備用。
B. 6 革蘭氏染色液
B. 6. 1 結晶紫染色液
B. 6. 1. 1 成分
結晶紫
1. 0g
GB4789. 41 — 2016
11
95% 乙醇 20. 0mL
1% 草酸銨水溶液 80. 0mL
B. 6. 1. 2 制法
將結晶紫完全溶解于乙醇中,然后與草酸銨溶液混合。
B. 6. 2 革蘭氏碘液
B. 6. 2. 1 成分
碘
1. 0g
碘化鉀
2. 0g
蒸餾水
300. 0mL
B. 6. 2. 2 制法
將碘和碘化鉀先行混合,加入少許蒸餾水充分振搖,待完全溶解后,再加蒸餾水至 300mL 。
B. 6. 3 沙黃復染液
B. 6. 3. 1 成分
沙黃
0. 25g
95% 乙醇 10. 0mL
蒸餾水
90. 0mL
B. 6. 3. 2 制法
將沙黃溶解于乙醇中,然后用蒸餾水稀釋。
B. 6. 4 染色方法
B. 6. 4. 1 將涂片在火焰上固定,滴加結晶紫染色液,染 1min ,水洗。
B. 6. 4. 2 滴加革蘭氏碘液,作用 1min ,水洗。
B. 6. 4. 3 滴加 95% 乙醇脫色 15s~30s ,直至染色液被洗掉,但不要過分脫色、水洗。
B. 6. 4. 4 加沙黃復染液,復染 1min ,水洗、干燥、鏡檢。
B. 6. 4. 5 革蘭氏陽性菌呈紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色。
B. 7 氧化酶試劑
B. 7. 1 成分
N , N , N' , N' - 四甲基對苯二胺鹽酸鹽 1. 0g
蒸餾水
100. 0mL
B. 7. 2 制法
將 B.
7. 1 成分溶解于冷水中,少量新鮮配制。
B. 7. 3 試驗方法
用細玻璃棒或一次性接種針挑去單個菌落,涂布在氧化酶試劑濕潤的濾紙上。在 10s 內呈現粉紅
GB4789. 41 — 2016
12
或紫紅色,即為氧化酶試驗陽性。不變色者為氧化酶試驗陰性。
B. 8 無菌 1mol
/ LNaOH
B. 8. 1 成分
NaOH 40. 0g
蒸餾水
1000. 0mL
B. 8. 2 制法
稱取 40g 氫氧化鈉溶于 1000mL 蒸餾水中,
121℃ 高壓滅菌 15min 。
B. 9 無菌 1mol
/ LHCl
B. 9. 1 成分
HCl 90. 0mL
蒸餾水
1000. 0mL
B. 9. 2 制法
移取濃鹽酸 90mL ,用蒸餾水稀釋至 1000mL ,
121℃ 高壓滅菌 15min 。
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